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玻連蛋白對高糖培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞的作用

發(fā)布時間:2013/06/24 23:23

作者:王玉鳳??楊俠??董曉光?
????發(fā)表時間:中華實驗眼科雜志??2013年1月??第31卷??第1期?
????【摘要】??
????背景??玻連蛋白是一種多功能糖蛋白。本研究組前期的動物實驗表明,玻連蛋白在缺氧小鼠視網(wǎng)膜中表達明顯增高,體外細胞實驗表明高糖可以誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細胞人(UVECs)中玻連蛋白表達的增加。但目前尚未證實玻連蛋白在視網(wǎng)膜新生血管病變中的作用機制。?
????目的??觀察玻連蛋白對高糖培養(yǎng)下人UVECs的細胞骨架結(jié)構(gòu)、細胞遷移、細胞成管能力的影響。?
????方法??建立高糖培養(yǎng)的人UVECs體外模型,利用干擾RNA技術(shù)干擾玻連蛋白的表達。實驗分為高糖組(含50mmol\L葡萄糖的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)人UVECs)、陰性干擾組(對照用siRNA預(yù)干擾人UVECs后,再用含50mmol\L葡萄糖的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)),在各組中分別利用Western?bolt法檢測玻連蛋白的表達量,免疫熒光細胞化學(xué)染色結(jié)合熒光顯微鏡觀察人?UVECs微絲骨架,劃痕法觀察人UVECs的遷移情況,Matrigel法檢測人UVECs的成管能力。各組的總體差異比較采用單因素方差分析,組間的多重比較采用LSD-t檢驗。?
????結(jié)果??Western?bolt結(jié)果顯示,0?h時3個組間玻連蛋白表達量的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.064,P>0.05);培養(yǎng)24?h時高糖組、陰性干擾組、陽性干擾組中玻連蛋白的表達量依次降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=15.519,P????結(jié)論??玻連蛋白可以引起高糖培養(yǎng)的人UVECs發(fā)生細胞骨架重塑、細胞遷移能力增加、細胞成管能力增強,可能是糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)新生血管形成的一個重要影響因素。?


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